饲料中维生素D3的测定
1 仪器及试剂
仪 器：
1). 分析天平一台（精度0.1mg）；
2). 超声波清洗机一台；
3). 溶剂过滤器（含泵）一套；
4). 微量进样器（100µl）一支；
5). 等度高效液相色谱仪；
试 剂：
1).实验室用水；
2). 甲醇，色谱纯；
3). 维生素D3标准品：含量≥99%；
4). 维生素D3标准贮备液；
5). 维生素D3标准工作液；
2 样品制备
称取饲料样品1g，精确至0.0001g，置于100ml的棕色容量瓶中，加入约80ml的甲醇，瓶塞不要拧紧，于65℃超声波水浴中超声提取30min，冷却至室温，用甲醇稀释至刻度，充分摇匀。则将溶液过0.45µm滤膜过滤，进样测定。使维生素D3的进样浓度与标准工作液浓度接近。
3 色谱条件
色谱柱： C18色谱柱 150mm×4.6mm×5μm；
流动相：甲醇+水（98+2）；
流速：1.0mlmin；
温度：室温；
进样量：20μl
检测波长：264nm。
4 色谱图
